Enzo Life Sciences：Cell, Nature高分認證CYTO-ID自噬試劑盒2.0

自噬（Autophagy）是調節真核細胞生長、死亡和能量代謝的重要生物學機制。細胞自噬行使其生物學功能的前提是自噬流（Autophagic Flux）的活化。大量證據表明自噬流受損與多種慢性炎性疾病，特別是腫瘤、神經退行性疾病及組織纖維化的發病密切相關，目前對于自噬流的檢測是自噬與其相關疾病研究領域的熱點。

什么才是活細胞自噬分析金標準呢？作為專業的生命科學醫藥原料供應商，艾美捷科技為您推薦Enzo Life Sciences（Enzo）榮譽出品，Nature/Cell海量引用，升級款- CYTO-ID自噬檢測試劑盒(CYTO-ID Autophagy detection kit 2.0)

*** 該產品僅用于科研實驗.

CYTO-ID Autophagy Detection Kit 2.0 使用新型染料檢測自噬小泡和監控活細胞自噬流，選擇性標記積累的自噬小泡。染料已通過優化，不染溶酶體，在自噬前體、自噬體和自噬溶酶體里呈現出明亮的熒光。該試劑盒提供了一種無需細胞轉染，可以在活細胞中監控細胞自噬的快速定量方法。

• CYTO-ID自噬檢測試劑盒2. 0原理：

該產品所用探針是陽離子兩親性示蹤劑（CAT）染料，以類似誘導磷脂藥物的方式迅速進入到細胞中。染料的功能基團能夠選擇性標記與自噬通路相關的小泡，而不會在溶酶體中聚集。胞內物質被擴大的膜囊包裹，吞噬泡形成雙層膜囊泡，成為自噬體。自噬體外膜隨后與溶酶體融合，和內部物質被自噬性溶酶體降解。

• CYTO-ID自噬檢測試劑盒 2.0優勢：

• 更明亮，更耐光，特異性染色自噬小泡

• 無需轉染及轉染效率驗證

• 快速量化原生異質性細胞群中的自噬

• 不染溶酶體，減少其他染料的背景干擾

• 便于高通量篩選自噬激活劑和抑制劑

• CYTO-ID自噬檢測試劑盒 2.0應用：

• CYTO-ID自噬檢測試劑盒 2.0- 新老替代：

* 用量說明：以ENZ-KIT175-0200為例，流式分析（200次）；熒光顯微鏡（250次）；96孔板（3*96well）

• CYTO-ID自噬檢測試劑盒 2.0，ENZ-KIT175，Nature/Cell文章鑒賞：

①Nature文章：Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020).

【摘要】自噬是一種維持細胞穩態的降解程序。自噬缺陷在許多疾病中都有描述。然而，由于目前可用的用于測量自噬誘導的工具的局限性，自噬率的分析可能具有挑戰性，特別是在稀有細胞群或體內。在這里，我們描述了一種通過測量蛋白質 ATG16L1 的磷酸化來監測自噬的方法。我們開發并表征了一種單克隆抗體，可以檢測哺乳動物細胞中的內源性磷酸化 ATG16L1。重要的是，磷酸-ATG16L1 僅存在于新形成的自噬體上。因此，其水平不受長期壓力或晚期自噬阻滯的影響，這可能會混淆自噬分析。此外，我們表明 ATG16L1 磷酸化是一種保守的信號通路，由許多自噬誘導應激源激活。所述抗體適用于免疫印跡、免疫熒光和免疫組織化學，測量的磷酸化 ATG16L1 水平直接對應于自噬率?？傊?，這種磷酸化抗體代表了研究自噬誘導的令人興奮的工具。

② Cell文章：Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell vol. 177,2 (2019):

【摘要】自噬在延長壽命的不同范例中是必需的，這導致了一種普遍的觀念，即自噬有益于長壽。然而，為什么自噬在某些情況下是有害的仍然無法解釋。在這里，我們表明線粒體通透性定義了自噬對衰老的影響。由于線粒體通透性增加，缺乏血清/糖皮質激素調節激酶-1 (sgk-1) 的秀麗隱桿線蟲的自噬升高出人意料地縮短了壽命。在 sgk-1 突變體中，降低自噬水平或線粒體通透性轉換孔 (mPTP) 開口可恢復正常壽命。值得注意的是，在所有檢查自噬依賴性壽命延長的范例中都需要低線粒體通透性。遺傳誘導的 mPTP 開放阻斷了由熱量限制或生殖系干細胞丟失導致的自噬依賴性壽命延長。線粒體通透性同樣將自噬轉化為哺乳動物的破壞力，因為肝臟特異性 Sgk 敲除小鼠表現出肝細胞自噬、mPTP 開放和缺血/再灌注損傷死亡的顯著增強。靶向線粒體通透性可以最大限度地發揮自噬在衰老中的作用。

已發表文章（尚有幾百篇未展示）：

• Thongon, Natthakan, et al. "Hematopoiesis under telomere attrition at the single-cell resolution." Nature communications 12.1(2021)

• Cabezudo, Sofía, et al. "Gαq activation modulates autophagy by promoting mTORC1 signaling." Nature communications 12.1(2021): 1-19.

• Tian, W., Alsaadi, R., Guo, Z. et al. An antibody for analysis of autophagy induction. Nat Methods 17, 232–239 (2020)

• Zhou, Ben et al. "Mitochondrial Permeability Uncouples Elevated Autophagy and Lifespan Extension". Cell  vol.177,2 (2019)

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