細胞收縮研究的小伙伴有福了,艾美捷代理的Cell Biolabs品牌提供兩種不同的3D膠原細胞培養模型,幫助研究人員更加方便地對細胞的收縮能力進行體外分析,即兩步法附著模型(two-step attached model)和漂浮基質收縮模型(floating matrix contraction model)。
細胞收縮-兩步法附著模型(two-step attached model) | ||
貨號 | 名稱 | 特點 |
Cell Contraction Assays, Two-Step Attached Model(細胞收縮分析,兩步法附著模型) | 1.用3D膠原基質培養細胞,通過測量膠原基質大小的變化來分析細胞收縮情況 2. 可以通過分析細胞收縮來篩選細胞收縮介質 3.試劑盒中包含了細胞收縮抑制劑作為實驗可選組分 | |
細胞收縮-漂浮基質收縮模型(一步法)(Floating Matrix Model) | ||
CBA-5020(24 assays) | Cell Contraction Assay Kit (Floating Matrix Model)(細胞收縮分析,漂浮基質收縮模型) | 1.采用了專門的細胞收縮培養板免去了膠原基質釋放步驟(一步法) 2.用3D膠原基質培養細胞,通過測量膠原基質大小的變化來分析細胞收縮情況 3.試劑盒中包含了細胞收縮抑制劑作為實驗可選組分 |
CBA-5021(48 assays) |
備注:上述產品僅限用于科研學術研究用途,不得用于醫療與診斷。
常見問題解析:
Q1:細胞收縮試劑盒是否只適用于成纖維細胞樣本?
A1:Cell Biolabs提供的兩種不同的細胞收縮分析試劑盒都是基于膠原凝膠的細胞收縮試驗,它不是細胞類型特異性試驗。像成纖維細胞一樣,適用于其他具有收縮能力的細胞,例如周細胞、平滑肌細胞和小梁網細胞等。
Q2:CBA-201中沒有提供培養板,需要準備多大尺寸的培養板?
A2:CBA-201需要客戶自備24孔細胞培養板,廠家實驗室使用的24孔板頂部孔直徑為16.26毫米,孔底部直徑為15.62毫米,也可以使用其他尺寸的培養板,但是需要調整實驗條件。(備注:CBA-5020&CBA-5021試劑盒中提供了抗粘附涂層的專用細胞收縮培養板)
Q3: 膠原蛋白聚合后需要加入液體培養基(CBA-201 step 4; CBA-5020 step 5),是加入試劑盒中提供的DMEM培養基,還是其他培養基?
A4:如果客戶的細胞不適用DMEM培養,他們可以使用特定于自身細胞樣本的培養基。
Q4: 膠原蛋白聚合失敗是什么原因?
A4:pH是膠原蛋白聚合的關鍵因素:細胞收縮試劑盒中提供的膠原蛋白溶液是呈酸性的,在實驗前必須中和掉。當5X DMEM添加到膠原蛋白溶液中時,它會變成黃色,因為它仍然是酸性的,但是一旦添加了中和溶液,pH應該是中性的,它應該變成粉紅色。膠原蛋白只會在中性pH值下形成凝膠,因此在配制Collagen Gel Working Solution時使用校準的移液器非常重要。如果混合液仍然不是中性,可以考慮慢慢加入更多的中和溶液,直到溶液呈中性。這應該以 0.5-1.0?l 的增量緩慢進行,因為如果添加太多,pH會變成堿性,但很難根據顏色來判斷??蛻艨梢酝ㄟ^測pH值來確認是否是中性的。
如果經判斷pH沒有問題,那么建議客戶嘗試在Eppendorf管中進行小規模配制Collagen Gel Working Solution,看看是否能看到聚合反應:
Q5:釋放膠原凝膠前是否需要徹底清除孔中的培養基?(cat#CBA-201)
A5:釋放凝膠時無需去除培養基。 (備注:請注意,釋放凝膠時,小心地將無菌刮刀插入孔壁和凝膠之間,然后沿著壁緩慢循環移動以完全釋放整個凝膠。 輕輕搖動板,凝膠也應從孔底部釋放。)
Q6:細胞培養兩天后,需要在膠原基質釋放前加入收縮介質,如BDM。但是說明書中沒有顯示加入BDM后需要培養多長時間?(cat#CBA-201)
A6:是否加收縮介質以及加入的收縮介質培養多長時間都是可選的,根據客戶的需求客戶也可以研究不同培養時間條件下的細胞收縮情況。(備注:客戶應在釋放凝膠之前添加收縮介質。 例如,如果他們想處理細胞2小時,需要在釋放凝膠之前加收縮介質培養細胞2天。 但是需要注意的是,對于像2天這樣的長時間孵育,客戶應該對收縮介質在37°C下穩定多長時間有所了解。 如果收縮介質在2天內不穩定,會隨著時間的推移而降解,則需要隨時更換培養基。)
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