1、什么是內毒素?
早在 19 世紀末,Albert Charrin 和 Armand Ruffer 等科學家通過簡單而有效的實驗證明,過濾培養的細菌可以在沒有完整細胞的情況下引起發燒。細菌學家理查德·弗里德里?!ぜs翰內斯·菲佛后來發現了內毒素的存在,他發現部分細菌本身,在他的案例中是霍亂弧菌,會引起中毒。
我們今天知道,這種作用是由脂多糖 (LPS) 介導的,它是革蘭氏陰性菌外膜 (OM) 的重要組成部分(圖1)。這意味著,與名稱所暗示的相反,內毒素存在于細菌外部。
圖 1:內毒素,也稱為脂多糖 (LPS),是革蘭氏陰性菌外膜的主要成分,在細胞裂解時釋放或作為外膜囊泡 (OMV) 的一部分釋放。 |
LPS提供了必要的滲透屏障,并覆蓋了例如多達75%的大腸桿菌表面。這使其成為細胞表面最豐富的抗原。LPS 對于大多數革蘭氏陰性菌的生存是必不可少的。在哺乳動物中,LPS 可引起致熱(發熱反應)反應,并通過誘導炎性細胞因子影響許多細胞功能。
經典的脂多糖結構,如左圖所示,由物種之間差異很大的O側鏈(O抗原)、稱為核心寡糖的中間區域和糖脂(Lipid A)錨定在外膜。O抗原的存在與否決定了LPS是粗糙的還是光滑的。 |
2、內毒素檢測的用途是什么?
只要需要評估研究中使用的生物和環境樣品的完整性,內毒素檢測就很有用。
示例包括:
1)無菌樣品的認定
2)輔助評估人類/獸醫細菌感染
3)水和環境空氣質量指標
4)食品保質期確定(牛奶、果汁、海鮮等)
3、EndoAlert 毒素檢測試劑盒合適的樣品類型:
4、EndoAlert 內毒素檢測試劑盒
Rockland 提供兩種內毒素檢測試劑盒 (RUO)。兩種試劑盒都使用鱟變形細胞裂解物 (LAL),這是一種來自鱟 ( Limulus polyphemus ) 的血細胞提取物,可與LPS 發生反應。
產品/貨號 | 顯色裂解物 | 內毒素標準品 | LAL Reagent | 內毒素特異性組成緩沖液 | 96孔板 |
EndoAlert? 內毒素檢測試劑盒(KMA-0100) | 是 | 是 | 是 | - | 是 |
EndoAlert? ES內毒素檢測試劑盒(KMA-0200) | 是 | 是 | 是 | 是 | 是 |
上述兩款試劑盒均基于在405 nm處測量的顯色鱟試劑,比凝膠法更靈敏、更定量。EndoAlert 內毒素檢測試劑盒使用的是LAL Reagent,它能同時與LPS(內毒素)和 BD-葡聚糖(真菌污染物)發生反應。
EndoAlert ES 內毒素檢測試劑盒使用內毒素特異性組成緩沖液,該緩沖液可滅活并阻斷G因子通路(真菌)。C因子(LPS 結合蛋白)通路保持完整,檢測內毒素時特異性更強。
5. 為什么選擇 EndoAlert? 內毒素檢測試劑盒?
①檢測的成本低 - 由Trident Biosystems設計,該公司擁有70多年的鱟試劑制造經驗,允許采用精益求精的方法進行開發,從而降低每次檢測的成本。
②易于使用 - 為研究和臨床使用而設計的用戶友好協議,無專門為Pharma指定的復雜的、受USP監管的測試要求。
③靈敏度高 - 跟市場上任何Pharma認證的試劑盒同樣敏感,并且比市場上任何研究用試劑盒更敏感、更穩定且功能更優越。
④對環境友好 - 原材料的收集高度小心,并由自然資源部監控,以確保合規。
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