美國Nanoprobes公司成立于1990年,專門生產免疫金標記和免疫測定試驗產品。主要為廣大科研機構提供用于檢測生物分子的最靈敏的試劑和技術。Nanoprobes公司獨特的金標技術使用化學交聯的金屬簇和納米顆粒作為標簽。與膠體金顆粒靜電吸附在抗體和蛋白質上的傳統免疫金探針不同,Nanoprobes公司的金標是與生物分子在特定位點交聯的不帶電荷的分子,故其探針具有膠體金不具備的范圍和靈活性。Nanoprobes標簽可以附著在任何帶有反應基團的分子上,比如蛋白質、多肽、寡核苷酸、小分子和脂類等,以檢測和定位這些分子。其金標也可以和其他標簽結合,一起使用。Nanoprobes獨特的熒光納米金探針在一個探針中結合了納米金(Nanogold)和熒光素,用于熒光和電鏡兩種技術共同進行樣品成像。
新探針可基于天然生物分子的任何一個片段設計制作,標簽可定位于遠離結合位點處從而不影響探針與目標位點的結合。Nanoprobe的1.4nm納米金探針已被超過250篇文獻引用。
Nanoprobe公司獨家生產和銷售獨特的產品Nanogold?及結合了熒光與免疫金探針的FluoroNanogold。另外還生產一個完整的3、5、10、15、30nm納米金探針的產品系列,和一個包括具有獨特優點的銀增強和負染試劑產品系列,公司產品暢銷全球。
主要產品線:
1、納米金(Nanogold?)顆粒:
結合了抗體/熒光標記/脂類/鏈霉親和素的納米金、帶不同反應基的納米金顆粒、3-5nm/2-4nm/0.8nm/1.4nm, 帶正電/負電/不帶電荷,親水/疏水的納米金顆粒、Undecagold (Au11)
2、金增強/銀增強試劑
3、EnzMet?-替代HRP底物,檢測靈敏度高,分辨率高,用于原位雜交/免疫組化/顯微系統/免疫斑點/蛋白雜交等
4、檢測His標簽重組蛋白的Ni-NTA納米金和Goldiblot(用于蛋白雜交)
5、負染試劑:NanoVan(釩),Nano-W(有機鎢)
6、X-射線造影劑:AuroVist?, EnzMet?
1、納米金(Nanogold?)顆粒
①納米金結合物:共價結合了Fab’/IgG/鏈酶親和素/熒光/脂質/不同反應基團的納米金,是市面上最小的免疫金標探針,優于膠體金
應用類型及實例:
原位雜交(ISH),電子顯微鏡,光學和共聚焦顯微鏡,免疫印跡和IHC,凝膠染色Nanogold標記條帶
ISH(原位雜交)檢測:SiHa細胞中HPV 16的單拷貝 | 電鏡檢測:單馬來酰亞胺標記的Nanogold(箭頭)特異性結合在IgG分子上鉸鏈的硫醇位點。 |
光學顯微鏡檢測:紡錘體Tubulin標記,左:膠體金標記;右:Nanogold(納米金) | 免疫印跡檢測:Nanogold?-抗小鼠Fab'檢測小鼠IgG,實現了前所未有的靈敏度(0.1pg靈敏度) |
優點:
1)金顆粒與Fab’或IgG比例接近1
2)粒徑?。?nm),且均勻
3)低背景
4)靈敏度高
5)穩定
納米金(Nanogold?)顆粒產品推薦有標記上納米金(Nanogold)的二抗及鏈霉親和素;同時標記上納米金(Nanogold)和熒光的二抗;標記上納米金(Nanogold)的脂類、帶不同反應基團的納米金(Nanogold)顆粒等
② 3-5nm/2-4nm/0.8nm/1.4nm, 帶正電/負電/不帶電荷,親水/疏水的納米金顆粒:用帶化學基團的不同配基包被和穩定,溶解性不同
應用:在多種系統和環境中的應用廣泛
③ Undecagold (Au11):比納米金(Nanogold)小,直徑僅0.8nm。適用于*高分辨率電鏡(如掃描透射電鏡)或透射電鏡與圖像處理結合的技術。單個聚合物在TEM下通常不能被直接觀測到,染色更慢,與納米金相比,銀沉積的量更少。因此在很多應用中,建議選用納米金而非Undecagold。
2、金增強/銀增強試劑
3、EnzMet? - 新的生物標記和染色方法(Nanoprobe研發的磚利產品),使用酶探針選擇性的將銀沉積在目標位置,可替代HRP底物。
應用:
可替代HRP底物,用于原位雜交(ISH)/免疫組化/電鏡/關聯顯微系統/免疫斑點/蛋白雜交等
優點:
①染色清晰度優于傳統生色或熒光底物,長久不褪色,不擴散
②可檢測內源單拷貝基因(原位雜交中),高靈敏度
③高分辨率
④背景接近零
⑤無需更多處理,染色即在電鏡下可見
檢測原理:
EnzMet應用于免疫組化(IHC)過程中的原理 | EnzMet?用于原為熒光雜交(ISH)檢測的原理 |
應用實列展示:
免疫組化(IHC):石蠟包埋的人膀胱腺癌細胞角蛋白DAB染色(右)與EnzMet染色(右)對比。 | 免疫組化(IHC):DAB(左)EnzMet(右)染HER2擴增的組織 | 原位熒光雜交(FISH):人類乳腺癌活檢組織切片,其中Her 2/neu基因的單拷貝(每個正常細胞2個)通過EnzMet檢測(黑點),類似于FISH。然而,EnzMet能夠實現明場檢測、永久信號,并使用全強度H&E染色同時顯示基礎組織形態。 |
相關產品推薦:
品名 | 產品描述 | 貨號 | 規格 |
EnzMet? IHC / ISH HRP Detection Kit | 專為免疫組化和原位雜交優化的HRP檢測試劑盒 | 6001 | 150張載玻片 30ml |
EnzMet? Western Blot HRP Detection Kit | 在蛋白雜交中獲得*高靈敏度的EnzMet | 6002 | 100ml |
EnzMet? for General Research Applications | 普通實驗用的EnzMet | 6010 | 45ml |
4、Ni-NTA納米金和Goldiblot(用于蛋白雜交)– 特異性標記His標簽蛋白:
①Ni-NTA納米金
應用:
透射電鏡/掃描透射電鏡、光學顯微鏡、蛋白雜交、純化His標簽蛋白時,識別含目的蛋白的部分等實驗。
優點:
1)靈敏度高
2)探針小,分辨率高,8 nm Ni-NTA-納米金比抗體探針小
3)高溶解度,穩定
4)無背景
5)長久染色
6)5 nm Ni-NTA-納米金在電鏡下可見,不需金增強/銀增強
7)使用簡單
應用實例展示:
左:1.8nm Ni-NTA-納米金與His標簽蛋白相互作用 右:用Ni-NTA-納米金標記6xHis腺病毒Knob蛋白,未染色的掃描電鏡照片 | 上:5nm Ni-NTA-納米金的結構,顯示金屬螯合物與His標簽蛋白結合 下:5nm Ni-NTA-納米金的掃描電鏡圖,平均直徑5.11±0.84nm |
② Goldiblot(用于蛋白雜交)
應用:
1.蛋白雜交檢測帶His標簽的重組蛋白(染色時間1小時)
2.識別細胞裂解液或提取物中的His標簽蛋白
3.證實轉染細胞中His標簽蛋白的表達
優點:
1)更快更靈敏:1小時出結果,1ng靈敏度
2)低背景
3)長久信號
檢測帶His標簽蛋白靈敏度低至1ng |
5、負染試劑:
NanoVan(釩)可用于標準負染,建議用于納米金標記的樣品,使1.4nm極小的納米金清晰可見,而高原子數的染料使其模糊。
Nano-W(有機鎢)擴展性優良,密度高,對比度高,可與NanoVan混合得到中等密度負染試劑。
6、AuroVistTM :X-射線造影劑:
注射AuroVist 15 nm X射線造影劑后小鼠體內微CT | 靜脈注射 AuroVist?-15nm后,活體小鼠腿部和骨盆區域周圍的20?m血管。(血管造影) |
靜脈注射 AuroVist-15 nm后活體小鼠大腦的微型CT。 由于 AuroVist-15nm穿透受損的血腦腫瘤屏障, 腫瘤突出(白色密度) 。 右圖:通過計算去除顱骨,露出腦血管系統 |
優點:
1)用于活體,不破壞組織
2)低毒性,LD50 >5.0 g Au/kg
3)高對比度,比碘造影劑高3倍
4)顯微CT可成像直徑為20um的血管
5)9nm納米金在血液中存留時間比碘造影劑長,可達24h
6)使用濃度可比碘造影劑高4倍多
7)高濃度時滲透壓低
8)低粘度,可注射
9)腎臟將其清除
作為Nanoprobes在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供Nanoprobes優質的產品與服務。下圖為Nanoprobes公司授權艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作為Nanoprobes在中國區域的代理授權書:
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